BA Stock overenten in groter volume

BA Stock overenten in groter volume
Context BA Algen en schelpdieren produceren
Decompositie type IOR

Activity



Voor het opstarten van de buitenkweek moet een algenculture opgekweekt worden. Hierbij wordt de stock door middel van overenting geleidelijk gedurende enkele weken in een groter volume medium (gefiltreerd zeewater met toegevoegde nutriënten) gekweekt, bv. van 30 ml naar 100 ml kweekflesjes, die vervolgens worden verder gekweekt (geïnoculeerd) in erlenmeyers van 250 ml inhoud. Het eerste inoculum voor de startculturen komen van de voorraadcultuur. Als deze startculturen groeien, zullen ze gebruikt worden als inoculum voor de grotere startculturen, de overgebleven hoeveelheid wordt ook gebruikt als inoculum voor de nieuwe kleine startculturen.

  1. De eerste stap is het ontsmetten van de werkplek en handen. Een kleine hoeveelheid Ethanol 70% wordt gegoten over alle oppervlaktes die in aanraking komen met het materiaal dat gebruikt wordt om de algenculturen te maken. De handen worden ontsmet door ze te wassen met een beetje ethanol.
  2. Het water dat gebruik wordt voor de voorraad culturen wordt gefiltreerd over een aantal filters met verschillende maten. De kleinste maat is 0.2 μm. 1L Schot flessen worden gevuld en geautoclaveerd (15 psi voor 15 minuten). Als de water afgekoeld is worden de nutriënten toegevoegd, 1 ml Walne’s medium en 100 μl Vitamine oplossing. Voor diatomeeën wordt hierbij ook nog 4 ml silicaat toegevoegd. 5 weefselkweekflessen per algensoort worden gevuld met 70 ml gefiltreerd zeewater.
  3. De gehele 30 ml voorraadcultuur wordt overgebracht in de 100 ml weefselkweekfles.
  4. De datum van inoculatie en de algen soort worden op de nieuwe cultuur geschreven en de cultuur wordt in de klimaatkast geplaatst.

Grote startculturen

Figuur 1: Grote startculturen in opkweek (Kamermans et.al, 2012)
.

Er worden 3 L erlenmeyers gebruikt om de grote culturen te kweken. Deze culturen worden gehouden in de precultuurkamer onder een lichtintensiteit van 2000 luxes (per lamp) en kamertemperatuur van 19˚C. Als inoculum voor deze grote startculturen worden kleine startculturen van 100 ml gebruikt die niet ouder zijn dan 14 dagen. In het kweekprotocol staan de stappen voor het overenten nauwgezet beschreven (IMARES, 2012).




De View-Navigation (VN) pagina's.


De links naar andere pagina's.

Produceert BA Groter volume algen
Consumeeert BA Stockoplossing
Onderdeel van BA Algen kweken
Instantie van
Betreft


Afhankelijk van.

Afhankelijk van BA Steriel werken
Opmerkingen


Afhankelijk van.

Afhankelijk van BA Dichtheid algencultuur
Opmerkingen


Connectie.

Connectie type seq
Connecteert naar BA Overenten in raceways
Conditie hoge kwantiteit
Opmerkingen


Connectie.

Connectie type seq
Connecteert naar BA Overenten in fotobioreactor
Conditie hoge kwaliteit
Opmerkingen


De pagina's die linken naar deze pagina.

HZ University of Applied Sciences
Rijkswaterstaat, Ministerie van Infrastructuur en Milieu
Projectbureau Zeeweringen
Waterschap Scheldestromen
Provincie Zeeland
Deltares